小鼠超氧化物歧化酶ELISA試劑盒操作注意事項(xiàng)如下
檢測(cè)程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100u,將反應(yīng)板充分混勻后置37°C120分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4一6次,向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液100u。將反應(yīng)板充分混勻后置37°C60分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100u。將反應(yīng)板置37°C30分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100u,置37°C暗處反應(yīng)15分鐘。
8. 每孔加入100ul終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450mm處測(cè)吸光值。
操作注意事項(xiàng):
1. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
2. 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
3. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
4. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
5. 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
6. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
7. 加入試劑怕順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
8. 按照免疫球蛋白G(。)ELISA試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
9. 底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物對(duì)光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
10. 未開封的試劑盒:所有試劑均按試劑瓶標(biāo)簽上所示保存。請(qǐng)注意,收到試劑盒后請(qǐng)盡快將TB洗滌液,終止液保存于4℃,其他試劑保
存于-20°C。
11. 使用后的試劑盒:剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存,開封后的酶標(biāo)板要加干燥劑后密封保存于一20℃,避免潮濕。
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